除酵節的第一天，門徒來問耶穌，要在哪裡預備吃逾越節的筵席（17節）？
按正規，吃逾越節的筵席的時刻應在尼散月十五日開始的傍晚。但按約翰福音的記載（約十三1，十八28，十九14），耶穌最後的晚餐是設在尼散月十四日開始的夜晚（提前一天，也就是周四）。
這樣算起來，耶穌的死日便是尼散月十四日，也就是周五將盡的午後時分，正是宰殺逾越節羔羊的時刻。

耶穌吩咐門徒去找某一位不知名的人，那人會帶他們往他的家去。留心祂所說：「夫子說：『我的時候快到了，我與門徒要在你家裏守逾越節。』」（18節）可知到祂安然地面對死亡的逼近。
從馬可的敘述中可知，似乎耶穌與房主早有約在先，使用他的一間大屋（可十四13-16）。因為在逾越節期間的耶路撒冷，如不事先定妥，臨時是找不到這樣的大房子的。

門徒遵著耶穌所吩咐的，就去預備了逾越節的筵席（19節）。當耶穌與門徒用飯的時候，耶穌宣佈令人驚訝的事。祂說十二門徒中間，有一個會賣祂（21節）。
門徒心裏滿是憂傷和慚愧，他們一個一個問主：「主，是我麼？」（22節）門徒一一問了主，餘下猶大還沒問。這時，主說同祂蘸手在盤子裏的，就是出賣祂的人（23節）。
然後主便拿了一塊餅，蘸了肉汁，遞給猶大（約十三26）。這做法原本是一種心意，表示特別的感情和友誼。

他提醒門徒，說將要發生的事必然要成就，無法抗禦。然而出賣祂的人也必然要付上責任；那人不生在世上倒好（24節）。猶大獨自選擇了賣主，自然也要自己承擔後果。
最後，猶大惺惺作態，假意問耶穌出賣者是不是自己。耶穌便答：「你說的是。」（25節）猶大接了餅，便出去，那時候是夜間（約十三30）。因此，我們可以知道他沒有參與主在逾越節晚餐之後所設立的「主的晚餐」。
耶穌守過最後的逾越節，便設立我們所稱的主的晚餐。最重要的材料是餅和酒，已準備妥當，放在桌上，以作逾越節的食物。耶穌給這晚餐新的意義。

首先，祂拿起餅來，祝福，就擘開。祂遞給門徒時，說：「你們拿著喫，這是我的身體。」（26節）由於祂的身體還未被釘十字架，很明顯祂說的是比喻了，用餅象徵祂的身體。
同樣，杯也含有象徵的意義，用來表達所裝的東西。杯裏裝著葡萄汁，象徵立約的血（27-28節）。這新立的約是主無條件的恩典，藉祂寶血的流出，赦免一切的過犯。祂的寶血足以赦免所有人的罪。
聖經中的「約」是指神和祂百姓之間的約定。路加特別說，「這是用我血所立的新約」（路二十二20），意思是神與以色列的舊約已經成就、更新。耶穌的話，意味著新約是神以他兒子的死與人立約。

然而，這裏說為多人流出來，表示只有在相信的人，這血才能生效，塗抹眾罪污。耶穌提醒門徒，祂不會再與他們同喝這葡萄汁，直到祂再來掌權（29節）。那時，喝的酒有新的意思，表示父的國滿有喜樂和祝福。

• 同你們喝新的: 耶穌所說的是指在天國的團契。

主耶穌所設立的主餐我們稱做聖餐，有幾個具體的意義:

1. 食物象徵基督在屬靈上餵養我們；
2. 擘餅舉杯象徵基督為我們死；
3. 領受餅和杯象徵信徒接受基督；
4. 信徒一起領聖餐，象徵信徒是基督家庭的一份子。

基督徒領受聖餐與接受救恩的條件是一樣的，也就是必須認罪悔改，並憑著信心接受主的救恩。
享用了主的晚餐，門徒便齊聲唱了詩。然後，他們便離開耶路撒冷，橫過汲淪溪，然後攀上橄欖山的西面，往客西馬尼園去（30節）。